Citometría de Flujo

Descripción del servicio

El Servicio de Citometría de Flujo brinda soporte científico-técnico para el análisis multiparamétrico de células y partículas en suspensión, así como para la separación celular de alta precisión. Permite la detección simultánea de múltiples marcadores fluorescentes a nivel de célula individual, facilitando la identificación y caracterización de subpoblaciones celulares en muestras complejas.

Aplicaciones

  • Inmunofenotipificación (marcadores de superficie e intracelulares)
  • Análisis de apoptosis y viabilidad celular
  • Estudios de proliferación y ciclo celular
  • Expresión de proteínas fluorescentes
  • Análisis de microorganismos
  • Cuantificación de proteínas solubles (CBA multiplex)
  • Separación celular (cell sorting) para aplicaciones experimentales, clínicas y biotecnológicas

Equipamiento disponible

Analizadores de flujo:

  • BD FACSCanto II™ (BD Biosciences): 2 láseres (488 nm, 633 nm), hasta 6 parámetros de fluorescencia + FSC/SSC.
  • Attune NxT (Thermo Fisher Scientific): citómetro con enfoque acústico, alto rendimiento (hasta ~65.000 eventos/seg), autosampler para placas y detección de hasta 9 parámetros.
  • BD LSRFortessa™ (BD Biosciences): citómetro multiparamétrico con 4 láseres (405, 488, 561, 640 nm) y hasta 18 parámetros simultáneos.

Separador celular:

FACSAria II (BD Biosciences): cell sorter con 3 láseres, capacidad de separación de hasta 4 poblaciones celulares simultáneamente y alta velocidad de adquisición (~70.000 eventos/seg).

Links de utilidad:

Teoría de citometría de flujo

Flow Cytometry – A Basic Introduction
Michael G. Ormerod

BD Biosciences – Flow Cytometry Web-Based Training

Bio-Rad - Introduction to Flow Cytometry – Basics Guide

Practical Flow Cytometry
Howard Shapiro

Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (2nd ed)
Cossarizza et al, (2019)

 

Diseño de paneles

Spectral viewer – Thermo Fisher

Spectral viewer - BD Biosciences

Flourescence spectra Analyser -  Biolegend

Flourofinder – Search and design platform

https://www.bio-rad-antibodies.com/spectraviewer.html

https://searchlight.semrock.com/

 

Links para aprender

Why antibody titration is important?

Doublet discrimination

How to set FSC Area scaling for doublet discrimination?

Flowjo training tutorial

Flowjo webinars

fluorescent protein database

 

Paula Andrea Abadie Paula Andrea Abadie

CPA

Doctora

Paula Andrea Abadie es Química y Bioquímica por la Universidad Nacional del Sur, y Doctora en Ciencias Químicas por la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Nacional de Córdoba. Es miembro de la Carrera de Personal de Apoyo del CONICET, donde se desempeña como Profesional Principal y desarrolla sus actividades en el servicio de Citometría del CIBICI.
Pilar Crespo Pilar Crespo

CPA

Doctora

Pilar Crespo es Bióloga y Doctora en Ciencias Químicas por la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Nacional de Córdoba. Es miembro de la Carrera de Personal de Apoyo del CONICET, donde desarrolla sus actividades en el servicio de Citometría del CIBICI.
Santiago Boccardo es Bioquímico y Doctor en Ciencias Químicas por la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Nacional de Córdoba. Es miembro de la Carrera de Personal de Apoyo del CONICET, donde se desempeña como Profesional Adjunto y desarrolla sus actividades en el servicio de Citometría del CIBICI.